Xét nghiệm oxidase
Xét nghiệm Oxidase
Xét nghiệm oxidase là một xét nghiệm sinh hóa quan trọng được sử dụng để xác định sự hiện diện của cytochrome oxidase, một loại enzyme tham gia vào chuỗi vận chuyển điện tử của một số vi khuẩn. Xét nghiệm này đặc biệt hữu ích để phân biệt giữa các loài vi khuẩn khác nhau, đặc biệt là trong các họ Pseudomonadaceae (oxidase dương tính) và Enterobacteriaceae (oxidase âm tính).
Nguyên tắc kiểm tra
Xét nghiệm oxidase dựa vào khả năng của cytochrome oxidase để xúc tác quá trình oxy hóa thuốc thử không màu, tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride, thành một sản phẩm màu, thường là màu xanh indophenol. Phản ứng xảy ra như sau:
- Phản ứng oxy hóa: Với sự hiện diện của cytochrome oxidase, thuốc thử bị oxy hóa, dẫn đến sự thay đổi màu sắc từ không màu sang tím đậm hoặc xanh lam.
- Giải thích:
- Kết quả dương tính: Sự phát triển của màu xanh tím đậm trong vòng 5 đến 10 giây cho thấy sự hiện diện của cytochrome oxidase.
- Kết quả âm tính: Không có sự thay đổi màu sắc hoặc độ trễ vượt quá 60 giây cho thấy sinh vật không sản xuất enzyme này
Thủ tục
Có một số phương pháp để thực hiện xét nghiệm oxidase, bao gồm:
- Phương pháp giấy lọc:
- Đặt một lượng nhỏ thuộc địa bị cô lập lên giấy lọc.
- Thêm một hoặc hai giọt thuốc thử oxidase.
- Quan sát sự thay đổi màu sắc trong vòng 10-30 giây.
- Phương pháp tăm bông:
- Nhúng một miếng gạc vô trùng vào thuốc thử và chạm nó vào một khuẩn lạc bị cô lập.
- Theo dõi sự thay đổi màu sắc ngay lập tức
Cân nhắc quan trọng
- Sử dụng thuốc thử và nuôi cấy tươi (tốt nhất là dưới 24 giờ tuổi).
- Tránh sử dụng các vòng kim loại, vì chúng có thể can thiệp vào kết quả thử nghiệm do các phản ứng tiềm ẩn với thuốc thử
Ứng dụng
Xét nghiệm oxidase chủ yếu được sử dụng cho:
- Xác định vi khuẩn sở hữu cytochrome oxidase, chẳng hạn như các loài Pseudomonas, Neisseria, Campylobacter và Vibrio.
- Phân biệt giữa vi khuẩn dương tính với oxy hóa và vi khuẩn âm tính với oxidase, điều này rất quan trọng để xác định vi sinh vật chính xác trong vi sinh lâm sàng
Ví dụ
- Sinh vật dương tính với oxidase:
- Pseudomonas aeruginosa
- Neisseria gonorrhoeae
- Campylobacter jejuni
- Oxidase âm tính sinh vật:
- Escherichia coli
- Thành viên của họ Enterobacteriaceae
Kết luận
Xét nghiệm oxidase đóng vai trò là một công cụ quan trọng trong vi sinh để xác định các loài vi khuẩn cụ thể dựa trên khả năng enzyme của chúng. Sự đơn giản và kết quả nhanh chóng của nó làm cho nó trở thành một quy trình tiêu chuẩn trong môi trường phòng thí nghiệm để phân biệt và nhận dạng vi sinh vật.


Ken MullinsAuthor